未解决

免疫组化中抗原修复的最佳条件是什么?
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尤其是微波修复

  • 提问者:xushengli 一级 试用期 2009-07-15 11:41

其他回答(1)

  • 关于抗原修复,我试过的修复条件有EDTA热修复,柠檬酸钠为缓冲液的微波修复以及高压锅修复。从我的实验结果来看,微波修复其实很不容易掉片子的,而EDTA热修复和高压锅修复是很容易掉片子的。因为掉片子主要是因为加热过程中产生的气泡所引起,而微波修复水加热到沸腾,沾在片子上的气泡就会少,不会因为小气泡上串引起脱片。做EDTA修复时,你可以将片子靠的尽量近些,或是在载玻片四周垫些棉花什么的,然后盖上盖玻片,这样修复的话就能够尽量减少载玻片上小气泡的形成。我们用的微波修复条件为:2.94 g柠檬酸三钠溶于1000 ml的水,调PH值至6.0,微波修复10分钟。你可以试试,时间可以根据需要自己调整。对于柠檬酸修复来说,只要高压修复时间控制在加阀冒气后90秒,冷水下终止开高压锅盖,高压修复和微波修复一样不掉片子,而且一般高压修复效果往往更好一点;关于EDTA热修复,一般说明书上都讲的是PH值等于9,实际上我试过,如果单传用EDTA,很容易掉片子,但是用Tris-EDTA,一般就不会掉片子了,Tris-base的浓度为0.05 mmol/L,高压和微波修复都可以,PH也等于9。
  • 回答者:scott 一级 试用期 回复时间:2009-07-15 11:43

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