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工程细胞快速高效构建表达技术平台

来源:河南省生物工程技术研究中心作者:申云龙日期:2020/11/22 12:40:46
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工程细胞快速高效构建表达技术平台是河南省生物工程技术研究中心成立的。主要进行用于抗体药物生产的“工程细胞”系的快速构建及相关研究。

目前,平台依据业内细胞系构建中常用的筛选体系“Dhfr-”和“GS”系统进行工程细胞构建,并建立符合cGMP要求的主细胞库(Cell Bank)、工作细胞库(Working Cell Bank)进行工程细胞的保存平台构建的工程细胞主要具备以下特性:生长特性良好,无血清悬浮培养密度高(1~2×10^7cell/ml);异源蛋白表达能力强(20~70 pg/cell/dayPCD),具备正确的翻译后修饰能力;宿主及重组细胞系遗传背景清晰、表型稳定,符合相关法规要求。

同时,平台通过进行工程细胞高表达载体的构建与优化,在用于重组抗体的表达的载体构建过程中,利用目的基因的简化、轻重链比例优化,顺式作用元件的应用等技术,大幅提高重组抗体的表达水平。现已完成哺乳动物蛋白表达、酵母表达、原核表达等多种蛋白表达体系的构建。拥有几十种表达载体和菌株,十多台荧光定量PCR仪、多种全自动发酵罐以及GMP车间等设备和场地,可以为工程细胞的快速构建和高效表达提供充足的场地、设备和技术支持。研发团队在王云龙教授的带领下先后完成国家科技支撑项目2项、省市科研项目27个,荣获国家级三等奖1项,省部级一等奖4项、二等奖3项。同时还发表了中文核心、SCI论文和共计一百余篇,申请专利20余项。

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