摘要：构建柯萨奇病毒A组16型（CVA16）衣壳蛋白VP1重组质粒pET-41a（+）/VP1,优化诱导表达条件,进行原核表达及蛋白纯化。通过PCR扩增获得VP1基因片段并转进大肠埃希菌E.coli BL21（DE3）内进行表达。从时间、温度、诱导剂浓度三个方面优化表达条件,收集表达菌体,经镍柱和DEAE柱纯化后,用蛋白印迹检测免疫反应性。结果表明,目的蛋白为包涵体,分子质量约为61ku,与设计蛋白分子质量大小相符,以诱导5h、IPTG的浓度为0.20mmoL/L、温度为37℃时蛋白表达量最高。纯化后蛋白纯度达到94%,蛋白印迹检测具有免疫反应性。试验成功获取了柯萨奇病毒A组16型（CVA16）VP1蛋白,且该蛋白具有免疫反应性。 

关键词：

柯萨奇病毒;VP1基因;原核表达;蛋白纯化;

论文链接：

https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFD2014&filename=DYJZ201404004