摘要：目的表达纯化肠道病毒71型（EV71）VP1蛋白,初步建立人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法。方法通过化学法合成肠道病毒71型VP1全基因序列,构建重组质粒pET-43.1a（+）/VP1,转化大肠杆菌BL21（DE）3,IPTG诱导表达,镍金属亲和层析纯化目的蛋白,产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定。以目的蛋白作为包被抗原,初步建立间接ELISA检测方法,并对77份6～10岁无手足口病症状儿童血清及手足口病现症患儿血清进行检测。结果成功构建重组质粒pET-43.1a（+）/VP1,VP1融合蛋白分子量约为43 kD,纯度可达95%;初步建立了人血清中抗EV71 IgG间接ELISA检测方法,36例HFMD现症患儿中EV71 IgG阳性22例（61.11%）;41例无手足口症状儿童血清中EV71 IgG阳性21例（51.22%）。结论表达产物具有较好的免疫原性,可用于肠道病毒71抗体检测。 

关键词：

肠道病毒71;VP1;表达;纯化;间接ELISA;

论文链接：

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