摘要：通过对鸡α干扰素基因的克隆,获取一定纯度的干扰素蛋白。从NCBI上搜索出鸡α干扰素基因的序列,根据其成熟蛋白编码序列设计引物,通过PCR从家鸡肝脏基因组中扩增出成熟鸡α干扰素的编码基因,利用基因重组技术构建出pUCm-T/IFN-α,再亚克隆至载体质粒pET-43.1a（+）,构建出pET-43.1a（+）/IFN-α重组质粒,经酶切鉴定、DNA测序,证明重组质粒构建正确。将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）进行发酵,IPTG诱导表达后进行纯化及SDS-PAGE分析。工程菌诱导表达后的电泳图谱在相对分子量约19kDa的位置出现明显目的条带,约占菌体总蛋白的30%,表达产物主要以包涵体形式存在,经过NI2+-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE电泳后经凝胶扫描纯度达95%以上。获得了纯度较高的目的蛋白,为下一步对鸡α干扰素进行复性及活性研究奠定了基础。

关键词：鸡α干扰素;PCR扩增;表达;纯化; 

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https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFD2008&filename=SWXZ200805015