摘要：目的建立狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法,制备狂犬病病毒（rabies virus,RV）的假病毒颗粒阳性对照。方法在RV的N基因保守区设计引物和探针,建立反转录实时荧光定量PCR检测方法,克隆得到噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因（MS2）,将其重组到质粒pET-28b（+）中,再将RV的N基因片段重组到MS2下游,经原核表达得到RV假病毒颗粒。结果实时荧光定量PCR检测RV重组质粒最低检测限为15拷贝/μl,重组表达质粒经原核表达可形成耐RNase的RV病毒样颗粒。结论建立了反转录实时荧光定量PCR检测RV核酸的方法,成功构建了可耐受RNase且无传染性的RV阳性对照。

关键词：聚合酶链反应;狂犬病病毒;假病毒颗粒;。 

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